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遺傳毒性試驗是評估藥物遺傳毒性的常用方法

更新時間:2020-08-23      點擊次數(shù):3356
  遺傳毒性試驗是一種使用哺乳動物或非哺乳動物細胞,細菌,酵母或真菌的測試,以確定測試樣品是否引起基因突變,染色體結構畸變以及其他DNA或基因變化。進行測試時,應在至少兩次測試中使用哺乳動物細胞來研究不同的測試終點,從而確定醫(yī)療器械(包括口腔器械))生物(口腔)材料和/或其提取物引起遺傳的能力損害和遺傳變化。這是遺傳毒理學研究的重要內(nèi)容。它可以檢測藥物是否具有誘變,異常和致癌作用,它是檢測基因突變和評估藥物遺傳毒性的常用方法之一。
  遺傳毒性試驗的原理:鼠傷寒沙門氏菌菌株(TA系列)是組氨酸缺陷型突變體,也就是說,它們失去了合成組氨酸的能力,因此無法在無組氨酸的培養(yǎng)基中生長。如果測試物質是誘變劑,則可以誘導菌株逆向突變并恢復合成組氨酸的能力,從而在缺乏組氨酸的堿性培養(yǎng)基中生長。菌落的數(shù)量反映了被測物質的致突變性。
  染色體畸變包括染色體的結構和數(shù)值畸變,由外源因素(例如破壞劑)誘導的染色體或染色體斷裂進一步導致染色體缺失和重排。常見的類型包括骨折,碎片,缺失,原位,移位等。在體外,在存在或不存在體外代謝活化的情況下,將哺乳動物細胞暴露于不同濃度的測試物質。一定時間后,用秋水仙堿處理細胞,使更多的有絲分裂細胞終止于中期。收集細胞進行吉姆薩染色,以觀察染色體結構和數(shù)目畸變。應建立至少3個測試劑量,溶劑對照組和陽性對照組。
  遺傳毒性試驗是檢測破損劑或有絲分裂毒物的有效方法。在細胞有絲分裂過程中,由于紡錘體功能障礙而形成的染色體結構破壞或染色體滯后導致的染色體片段由于紡錘體牽引力的損失而全部保留在細胞質中,形成了與核染色一致的染色體,稱為微核。嚙齒類動物的骨髓中多色紅細胞(PCE)的微核試驗是常用的。用測試物質處理嚙齒動物,然后殺死。取出骨髓,切片,固定并染色。在顯微鏡下計數(shù)PCE中的微核。體內(nèi)實驗可以更模擬體內(nèi)測試物質的轉化過程。因此,體內(nèi)微核試驗常被用作國內(nèi)外藥物,食品和化學藥品遺傳毒性評價的實驗組合之一。
 
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