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大腸埃希氏菌O157 LAMP檢測試劑盒

簡要描述:產(chǎn)品說明
CSPP多重PCR檢測試劑盒可同時檢測空腸彎曲菌(C. jejuni),結腸彎曲菌(C. coli),海鷗彎曲菌(C. lari),烏普薩拉彎曲菌(C. upsaliensis),和胎兒彎曲菌胚胎亞種(C. fetus subsp. fetus)等5種常見的彎曲菌屬致病細菌。
產(chǎn)品組成 (50次,20 µL PCR)
組分數(shù)量體積
Master Mix (2X) * 1管500

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質:生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2025-02-09
  • 訪  問  量:1626

詳細介紹

貨號 CSPP-v2.0供貨周期現(xiàn)貨
應用領域醫(yī)療衛(wèi)生,食品/農(nóng)產(chǎn)品,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥

產(chǎn)品說明

CSPP多重PCR檢測試劑盒可同時檢測空腸彎曲菌(C. jejuni),結腸彎曲菌(C. coli),海鷗彎曲菌(C. lari),烏普薩拉彎曲菌(C. upsaliensis),和胎兒彎曲菌胚胎亞種(C. fetus subsp. fetus)等5種常見的彎曲菌屬致病細菌。

產(chǎn)品組成 (50次,20 µL PCR)

組分

數(shù)量

體積

Master Mix (2X) *

1管

500 µL

Primer Mix

1管

200 µL

陽性對照

1管

50 µL

H2O

1管

1 mL

* Master Mix (2X)含有Taq DNA聚合酶, dNTP,含MgCl2的PCR優(yōu)化反應緩沖液,以及電泳時所必需的色素試劑。使用頻率高時一旦融解請于4oC保存或分裝保存。

儲存條件

-20oC長期保存。多次反復凍融會降低檢測效率。

使用說明

  • DNA樣本處理、反應體系配制、核酸擴增和結果鑒定等各步驟應分域進行,以避免交叉污染。
  • 細菌基因組DNA可使用市售試劑盒提取,也可按以下方法快速制備:
  • 從平板上挑取適量菌落,加入含有200 µL ddH2O的滅菌離心管中,渦旋震蕩混勻,肉眼可見菌液渾濁即可。
  • 菌液煮沸10 min,冷卻至室溫后,13,000 rpm離心2 min。
  • 將上清移至新離心管中,即得可用于本試劑盒檢測的細菌DNA模板。
  • PCR反應液配制:

2 X Master Mix 10 µL

 

Primer Mix 4 µL

陽性對照/樣品DNA 2 µL

H2O 4 µL

反應終體積 20 µL

  • PCR反應條件:

95oC 預變性 6 min

95 oC 變性 30 sec

30個循環(huán) 59 oC 復性 30 sec

72 oC 延伸 30 sec

72 oC 延伸  7 min

  • 瓊脂糖凝膠(2%)電泳檢測15 µL PCR擴增產(chǎn)物 (100 V,50 min)。5種彎曲菌屬細菌的檢測結果如下圖所示,其中23S rRNA作為擴增反應的內(nèi)參照,在所檢測的5種彎曲菌屬細菌均應可見其大小為650 bp的擴增片段。陽性對照應可見6條大小不同的擴增片段。

 

  • 注意事項:

試劑使用前建議短暫離心后開啟。

PCR反應液請在冰中配制,以增強檢測的特異性。

本試劑盒中Master Mix包含電泳所必需的試劑,PCR反應后可直接電泳。

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